| 摘 要： | 目的掌握克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)片段的精细抗原表位谱分布, 明确优势抗原表位在克里米亚-刚果出血热(CCHF)实验室检测中的价值。方法 2014—2021年在新疆大学生命科学院实验室将CCHFV YL04057株采用改良生物肽合成方法分段表达出由8个氨基酸组成的最小合成短肽, 以CCHFV多克隆抗体或单克隆抗体14B7(IgM)或CCHFV阳性羊血清为抗体, 用免疫印迹方法鉴定出NP和GP片段上具有抗原活性的最小抗原表位(BCE), 并采用邻接法将获得的具有序列多态性的BCE与不同地区的CCHFV进行空间聚类, 确定BCE组合方式与地理区域分布的相关性, 探讨其在建立血清学诊断中的应用价值。采用原核表达质粒(pET-32a、pGEX-KG)和带有不完整谷胱甘肽(GST188)标签的原核表达质粒(pXXGST-ST-1)构建和表达NP片段上6个不同肽段长度的优势抗原表位, 建立间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法, 以经免疫荧光法(IFA)鉴定的CCHF羊血清为对照, 统计分析不同肽段长度的抗原表位重组蛋白与IFA检测结果的特异度、敏感度...
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