基于阻断膜金属蛋白酶TRABD2A的HIV储存库检测方法的建立题录

目的探究人源化膜金属蛋白酶——含有TRAB结构域的蛋白2A(TRABD2A)单克隆抗体对接受联合抗逆转录病毒疗法(cART)的人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染者储存库细胞的作用效果, 建立基于TRABD2A阻断抗体的全新HIV-1储存库检测方法。方法 2021年5—12月于中国医科大学附属第一医院收集研究对象51例。其中健康者2名, 接受cART的HIV-1感染者(cART组)41例, 未接受cART的HIV-1感染者(no-cART组)8例。采用噬菌体展示库技术构建人源化TRABD2A单克隆抗体, 分别处理HIV-1感染者、未接受cART的HIV-1感染者及健康对照者的外周血单个核细胞(PBMC)和CD4+T淋巴细胞, 利用荧光素酶报告系统、单分子免疫阵列检测技术等方法检测细胞培养上清中病毒含量, 同时使用流式细胞术、荧光实时定量聚合酶链式反应检测处理后细胞的活化和病毒基因表达情况, 比较不同处理组之间病毒释放量和表面活化标志CD25、CD69、HLA-DR(人类白细胞DR抗原)表达量的差异。结果接受cART的HIV-1感染者的PBMC经人源化TRABD2A单克隆抗体处理后检测HIV...