| 人类心发育候选基因ZNF569融合EGFP真核表达载体的构建及表达 |
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| 作者姓名： | 黄欣琼 唐显庆 石金凤 吴秀山 龙治锋 |
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| 作者单位： | 南华大学组织学与胚胎学教研室,衡阳,421001;湖南师范大学生命科学院心脏发育研究中心,长沙,410081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，湖南省教育厅一般项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569,并鉴定其在哺乳动物COS-7细胞系能否正确表达.方法:把ZNF569基因ORF定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体,构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569,脂质体介导将pEGFP-ZNF569转染入哺乳动物COS-7细胞,以一步法RT-PCR检测其在哺乳动物COS-7细胞中的表达情况.结果:双酶切及测序鉴定表明成功构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569,并在COS-7细胞中成功地表达了融合荧光蛋白.RT-PCR检测显示RT-PCR扩增产物与ZNF569目的基因片段大小相符,确实源于重组质粒转录后的mRNA.结论:真核表达重组体pEGFP-ZNF569的成功构建及在体外真核细胞中有效表达,为进一步研究ZNF569在心发育过程中的信号调控奠定了一定的实验基础.
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| 关 键 词： | 心发育候选基因 增强型绿色荧光蛋白 真核表达载体 基因表达 |
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