| 人巨细胞病毒pp65抗原血症检测方法的建立和初步临床应用 |
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| 引用本文： | 赵缜,李敏,彭奕冰,支立明,潘宁,季育华. 人巨细胞病毒pp65抗原血症检测方法的建立和初步临床应用[J]. 检验医学, 2004, 19(1): 36-39 |
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| 作者姓名： | 赵缜 李敏 彭奕冰 支立明 潘宁 季育华 |
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| 作者单位： | 上海瑞金医院集团闵行医院检验科,上海,201100;上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海,200025 |
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| 摘 要： | 目的建立人巨细胞病毒抗原pp65(HCMVpp65)血症特异、灵敏和低成本的酶免组化和荧光免疫组化方法,以利于临床推广应用.方法以HCMV-AD169感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)爬片作阳性对照,选择试剂和材料组建试剂盒,并与商品化的同类试剂盒作比较,建立人外周血多形核白细胞(PMNLs)中HCMVpp65抗原阳性细胞的检测方法,然后再用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法做相应考评.结果我们建立的HCMVpp65抗原血症检测法能成功地检出PMNLs中的pp65阳性细胞.其可检测限分别为102 pfu/ml的AD169攻击24 h后的HELF细胞爬片和3～5个pp65阳性细胞/2×105 PMNLs;用高相对分子质量(500 000)的葡聚糖能快速、有效地分离PMNLs;用4%中性多聚甲醛固定的细胞片,于-20 °C或以下可长期保存(≥6个月),而且pp65抗原性稳定.结论自建的试剂盒与同类进口试剂盒相比,检测pp65的结果差异无显著性,并与FQ-PCR的检测结果相一致,其检测特异、灵敏、操作简单、费用低廉,适宜临床实验室推广应用.
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| 关 键 词： | 人巨细胞病毒pp65抗原血症 外周血多形核白细胞 荧光定量PCR |
| 文章编号： | 1001-2087(2004)01-0036-04 |
| 修稿时间： | 2003-06-27 |
Development and optimization of a laboratory assay for the human cytomegalovirus pp65 antigenemia and its preliminary clinical application |
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