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沉默核干细胞因子基因对HL-60白血病细胞形态学和细胞化学影响的检测
引用本文:岳保红,佘红纯,王清霞,刘帅,王园园,蔚利纳,张功员,张钦宪.沉默核干细胞因子基因对HL-60白血病细胞形态学和细胞化学影响的检测[J].检验医学,2009,24(4):281-285.
作者姓名:岳保红  佘红纯  王清霞  刘帅  王园园  蔚利纳  张功员  张钦宪
作者单位:1. 郑州大学第一附属医院检验科,河南,郑州,450052
2. 郑州铁路职业技术学院,河南,郑州,450052
3. 郑州大学基础医学院组织胚胎学教研室,河南,郑州,450052
基金项目:河南省医学科技创新人才工程项目,河南省郑州市科技攻关资助项目 
摘    要:目的探讨体外沉默白血病细胞核干细胞因子(Ns)基因转染后细胞形态学和细胞化学特征改变与细胞生物学行为的关系。方法体外合成Ns特异性短发夹状RNA(shRNA)转染HL-60白血病细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和免疫印迹法评价Ns基因沉默和Ns蛋白合成抑制效果,倒置显微镜观察活体细胞形态,Wright—Giemsa染色观察细胞形态学改变,血液分析仪测定细胞大小、粒度和均-性变化,髓过氧化物酶(MPO)、α-乙酸萘酯酶(α—NAE)和过碘酸-雪夫反应(PAS)测定反映细胞化学特征变化。结果沉默Ns基因导致HL-60白血病细胞发生了形态学变化,细胞核和细胞质出现了进-步分化和成熟特征,Wright—Giemsa染色观察到细胞核碎裂现象,血液分析仪发现细胞变得大小不均并有较多核碎裂和无核的细胞碎片存在,细胞内定MPO、α—NAE酶活性和PAS反应增强。结论沉默Ns基因表达能促使HL-60细胞进-步分化、成熟,细胞形态学和细胞化学特征发生相应改变,这些形态学变化可以作为研究细胞生物学行为改变的依据之一。

关 键 词:核干细胞因子  白血病  细胞形态学  细胞化学  HL-60细胞

Detection of effects of nucleostemin gene silencing on morphology and cytochemistry of HL-60 cells in vitro
YUE Baohong,SHE Hongchun,WANG Qingxia,LIU Shuai,WNAG Yuanyuan,YU Lina,ZHANG Gongyuan,ZHANG Qinxian.Detection of effects of nucleostemin gene silencing on morphology and cytochemistry of HL-60 cells in vitro[J].Laboratory Medicine,2009,24(4):281-285.
Authors:YUE Baohong  SHE Hongchun  WANG Qingxia  LIU Shuai  WNAG Yuanyuan  YU Lina  ZHANG Gongyuan  ZHANG Qinxian
Institution:YUE Baohong, SHE Hongchun, WANG Qingxia ,LIU Shuai, WNAG Yuanyuan, YU Lina ,ZHANG Gongyuan, ZHANG Qinxian ( 1. Department of Clinical Laboratory, the First Affiliated Hospital, Zhengzhou University, Henan Zhengzhou 450052, China; 2. Zhengzhou Railway Vocational and Technical College, Henan Zhengzhou 450052, China; 3. Department of History and Embryology, School of Basic Medical Science, Zhengzhou University, Henan Zheng- zhou 450052, China)
Abstract:
Keywords:Nucleostemin  Leukemia  Morphology  Cytochemistry  HL-60 cell
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