HLA-A^＊0201／WTl五聚体联合胞内IFNγ染色在检测白血病患者外周血WT1特异性T细胞中的应用

本研究探讨五聚体及胞内因子染色在定性定量检测抗原特异性T细胞中的应用价值。用RT—PCR方法检测受试者WT1表达水平；用HLA—A＊0201／wTl五聚体及胞内IFNγ染色检测14例表达HLA—A＊020l的白血病患者全相合移植前后及其供者外周血中的WT1特异性T细胞。结果表明：14例供者中2例有低水平WT1表达，白血病患者均有不同水平的WT1表达。14例供者均未检测到WT1＋CD8^＋CTL和WT1^＋IFNγ^＋细胞；移植前14例患者中2例可检出WT1^＋CD8^＋CTL，3例检出WTl^＋IFNγ^＋细胞，二者间无明显差异（P=0．357），而移植后均可检出WT1^＋CD8^＋CTL和WT1^＋IFNγ^＋细胞，明显高于移植前（P值均〈0．01）。移植后大部分患者均在30天内检出WT1^＋CD8^＋CTL和WT1^＋IFNγ＋细胞，但后者检出率高于前者（P=0．014）。14例患者中WT1^＋CD8^＋CTL峰值中位数为0．18％，而WT1^＋IFNγ^＋细胞峰值中位数为0．83％，明显高于前者（P=0．005）；WT1^＋CD8^＋CTL峰值中位时间为移植后75天，WT1^＋IFNγ^＋细胞峰值中位时间为移植后105天，但二者间无明显差异（P=0．455）。结论：五聚体及胞内IFNγ染色能有效检测白血病患者外周血中白血病抗原特异性T细胞；两种方法联合检测有助于抗原特异性T细胞的准确定性定量检测。