| 弓形虫表面抗原P22编码基因片段的亚克隆与表达 |
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| 引用本文： | 高世同,吴少庭,林敏,梁驹卿,占国清.弓形虫表面抗原P22编码基因片段的亚克隆与表达[J].中国病原生物学杂志,2002,15(1):24-26. |
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| 作者姓名： | 高世同 吴少庭 林敏 梁驹卿 占国清 |
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| 作者单位： | 1. 深圳市卫生防疫站,广东深圳,518020
2. 广东省妇幼保健医院,广东广州,51000 |
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| 摘 要： | 目的亚克隆弓形虫RH株表面抗原P22编码基因,构建表达质粒pBK/P22,并对其在大肠杆菌(E.coli)中的表达作初步研究. 方法以限制性内切酶BamHⅠ和KpnⅠ双酶切质粒pBCG5.6/P22,获得弓形虫表面抗原P22编码基因目的片段,在以低熔点琼脂糖回收纯化后,插入表达质粒载体pBK-CMV的多克隆位点,构建重组体pBK/P22,并转化大肠杆菌DH 5α,快速酚法初筛阳性重组子,阳性克隆以PCR法与限制性酶切分析鉴定后,以IPTG进行诱导在E.coli DH 5α中表达,表达产物以SDS-PAGE与免疫印迹分析. 结果双酶切质粒pBCG5.6/P22,获得约593 bp的P22编码基因片段,与预期片段大小相符;所构建pBK/P22重组体阳性克隆经双酶切和PCR鉴定与预期结果一致;SDS-PAGE与免疫印迹显示,表达产物的大小约28 ku. 结论成功亚克隆并构建了弓形虫表面抗原P22编码基因pBK/P22表达质粒,诱导表达了弓形虫P22表面抗原蛋白,为抗原免疫特性的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 弓形虫 P22表面抗原 基因克隆 表达 |
| 文章编号： | 1001-6627(2002)01-0024-03 |
| 修稿时间： | 2001年2月23日 |
SUBCLONING AND EXPRESSION OF THE GENE ENCODING OF THE P22 SURFACE ANTIGEN OF TOXOPLASMA GONDII |
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| GAO Shi tong ,WU Shao ting ,LIN Min ,LIANG Ju qing ,ZHAN Guo qing.SUBCLONING AND EXPRESSION OF THE GENE ENCODING OF THE P22 SURFACE ANTIGEN OF TOXOPLASMA GONDII[J].Journal of Pathogen Biology,2002,15(1):24-26. |
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| Authors: | GAO Shi tong WU Shao ting LIN Min LIANG Ju qing ZHAN Guo qing |
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| Institution: | GAO Shi tong 1,WU Shao ting 1,LIN Min 1,LIANG Ju qing 2,ZHAN Guo qing 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Toxoplasma gondii P22 surface antigan DNA clone DNA expression |
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