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兔主动脉内皮细胞培养及鉴定:内皮细胞分离方式及培养条件的改良
引用本文:高航,关春艳. 兔主动脉内皮细胞培养及鉴定:内皮细胞分离方式及培养条件的改良[J]. 中国神经再生研究, 2010, 14(11): 1919-1922
作者姓名:高航  关春艳
作者单位:辽宁医学院附属第一医院心内科,辽宁省锦州市121001,辽宁医学院附属第一医院心内科,辽宁省锦州市121001
摘    要:背景:获取内皮细胞的方法有机械刮取、组织块移植和酶消化法3种。一直以来,内皮细胞的培养方法也在不断的更新。目的:探讨兔主动脉内皮细胞的培养和鉴定方法。方法:取1周龄新西兰大耳白兔主动脉,剥去外膜,内膜面向下铺入2 g/LⅠ型胶原酶、2 g/LⅢ型胶原酶,2 g/L Ⅳ型胶原酶和2 g/L Ⅴ型胶原酶混合消化液中(按1∶1∶1∶1∶1混合)消化20 min,按1∶1加入培养基以终止消化。轻轻刮下内膜层细胞,将细胞悬液离心,用DMEM培养液(含胎牛血清20%、VEGF 1 μg/L、bFGF 2 μg/L,庆大霉素6 U/L)混匀沉淀细胞,吹打分散至单个细胞培养,48 h后用首次换液。再按1∶2分瓶传代培养。采用倒置相差显微镜观察细胞培养结果。免疫组织化学及免疫荧光鉴定Ⅷ因子相关抗原。电镜观察Weibel-Paladed小体。结果与结论:体外获得并培养5代内皮细胞。Ⅷ因子相关抗原及电镜观察W-P小体均证实实验成功的培养了原代及传代内皮细胞。提示兔主动脉内皮细胞可从主动脉获得并通过培养成为细胞系,Ⅷ因子相关抗原及电镜观察W-P小体联合鉴定是确定内皮细胞的良好方法。

关 键 词:内皮细胞  细胞培养  鉴定  酶消化  血管组织工程

Culture and identification of rabbit aortic endothelial cells: Modified isolation and culture of endothelial cells
Gao Hang and Guan Chun-yan. Culture and identification of rabbit aortic endothelial cells: Modified isolation and culture of endothelial cells[J]. Neural Regeneration Research, 2010, 14(11): 1919-1922
Authors:Gao Hang and Guan Chun-yan
Affiliation:Department of Cardiology, First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University, Jinzhou 121001, Liaoning Province, China,Department of Cardiology, First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University, Jinzhou 121001, Liaoning Province, China
Abstract:
Keywords:Endothelial cells Cell Culture Identification
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