人HL-60细胞GRα-LBD诱饵表达载体的构建和鉴定 |
| |
引用本文: | 钟梁,郝坡,刘北忠,王东生,刘畅,金丹婷,王翀,王春光.人HL-60细胞GRα-LBD诱饵表达载体的构建和鉴定[J].重庆医科大学学报,2008,33(4):394-398. |
| |
作者姓名: | 钟梁 郝坡 刘北忠 王东生 刘畅 金丹婷 王翀 王春光 |
| |
作者单位: | 重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金
,
国家中医药管理局科研项目
,
重庆医科大学校科研和教改项目 |
| |
摘 要: | 目的:构建糖皮质激素(Glueocorticoid,GC)受体α配体结合域(GRα-LBD)的诱饵表达载体,为小分子配体酵母三杂交系统的建立奠定基础.方法:RT-PCR扩增HL-60细胞的GR α-LBD,克隆入诱饵载体pGBKT7中,测序正确后,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR α-LBD转化到酵母AH109细胞中,提取酵母蛋白,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况.同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果:成功扩增了GRα-LBD,并成功亚克隆到pGBKT7中,测序结果正确.诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Westrrn blot分析也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白.结论:成功构建了GRα-LBD酵母诱饵表达载体,为建立小分子配体酵母三杂交系统奠定了基础.
|
关 键 词: | HL-60 GRα-LBD 诱饵载体 诱饵蛋白 |
文章编号: | 0253-3626(2008)04-0394-05 |
修稿时间: | 2007年11月5日 |
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录! |
|