NY-ESO-1致敏树突状细胞诱导的CTL对肝癌细胞株的特异性杀伤作用

目的：探讨肿瘤睾丸抗原NYESO1（New Yorkesophageal1）致敏树突状细胞体外诱导特异性CTL对肝癌细胞株的杀伤作用。方法：重组质粒pGEXESO1经原核诱导表达并纯化GSTESO1融合蛋白肽。重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGMCSF）和白细胞介素4（rhIL4）诱导培养人外周血来源的树突状细胞（dendritic cells, DCs），经GSTESO1融合蛋白肽致敏后诱导特异性CTL增殖。以此CTL为效应细胞，分别以NYESO1阳性表达的肝癌细胞株HepG2和不表达NYESO1的肝癌细胞株H2P为靶细胞，MTT法检测CTL对肝癌细胞株的杀伤作用。结果：重组质粒pGEXESO1经IPTG诱导，在大肠杆菌中表达相对分子质量约36 000的GSTESO1融合蛋白肽，纯化后的质量浓度为50 μg/ml；经rhGMCSF和rhIL4联合诱导成功培养人外周血DCs，其表型分子HLADR为91.4%、CD86为70.5%、CD83为71.2%、CD80为55.3%。NYESO1致敏的DCs能明显诱导CTL增殖，此CTL对肝癌细胞株HepG2的杀伤率显著高于GST刺激组、未致敏DC组和无DC刺激组(均P<0.05)，效靶比为50∶1时杀伤效应达到最高峰\(53.23±3.78)%，P<0.01\]；相同条件下CTL对H2P细胞无特异性杀伤作用。结论： NYESO1抗原致敏的DCs在体外可诱导同种CTL产生和增殖，后者对NYESO1阳性肝癌细胞株具有特异性杀伤效应，该方法为肝癌免疫治疗提供了一条新思路。

CTL induced by NY-ESO-1 impulsed dendritic cells specifically kills NY-ESO-1 positive human hepatocellular caner cells