紫外线灭活后甲型肝炎病毒的抗原性

作者在用紫外线(UV)照射增殖于人胚胎成纤维细胞(HFS)的纯化的甲型肝炎病毒(HAV)后,对其抗原性、感染性、基因组滴度作了评估,并与现行的福马林(FM)灭活法进行了比较。 毒株HAV/HFS/GBM在HFS传30代后,用胰蛋白酶消化细胞单层。离心收集细胞,用1％NP40复悬,反复冻融3次。再于冰浴中声波处理5分钟,离心除去细胞碎片,用聚乙二醇浓缩上清,对生理盐水透析,抽提两次,CsCl梯度离心22小时,从1.23～1.33g/cm~3处收集HAV,对生理盐水透析,用0.2μm滤膜过滤。纯化的HAV用0.9％NaCl溶液稀释100倍。用最大强度接近254nm的低压