抗AGR2单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用 |
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引用本文: | 武正华,朱奇,杲光伟,周辰晟,李大伟.抗AGR2单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(1). |
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作者姓名: | 武正华 朱奇 杲光伟 周辰晟 李大伟 |
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作者单位: | 1. 上海交通大学药学院,上海,200240 2. 上海交通大学医学院,上海,200025 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的:制备鼠抗AGR2单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定及其初步应用研究。方法:以AGR2-MBP融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗AGR2的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb的效价,以Western blot鉴定mAb的特异性。用免疫荧光、免疫沉淀和MTT法对mAb进行初步应用研究。结果:获得1株可持续、稳定分泌抗AGR2的mAb的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),腹水mAb的效价达1×10-6。Western blot检测显示,在Mr为20000处有1条清晰的带。免疫荧光显示,该mAb可与乳腺癌细胞中的AGR2蛋白结合。免疫沉淀证实该mAb可与天然状态的AGR2有效结合。MTT实验显示该mAb对乳腺癌细胞MCF7的生长有抑制作用。结论:制备出的鼠抗AGR2的mAb效价高、特异性良好,可抑制细胞的生长,有一定的应用价值,为进一步研究AGR2的功能及其在乳腺癌、前列腺癌等癌症的诊断和治疗中的作用提供了工具。
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关 键 词: | 单克隆抗体 肿瘤诊断 治疗性抗体 |
Preparation,characterization and potential application of monoclonal antibody 18A4 against AGR2 |
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Abstract: | |
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Keywords: | AGR2 AGR2 mAb cancer diagnosis therapeutic antibody |
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