外源性硫化氢对嗜铬细胞瘤细胞β位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达的影响

 目的观察外源性硫化氢（H2S）对嗜铬细胞瘤细胞（PC12）茁位淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）表达的影响，并探讨可
能涉及的细胞信号机制。方法用不同浓度的硫氢化钠（NaHS）处理体外培养的PC12细胞，利用RT-PCR和Western blot法检
测细胞内BACE1mRNA及蛋白表达；继以LY294002 和PD98059 分别阻断磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（PI3-K/
Akt）及丝裂酶原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶1/2（MAPK/ERK1/2）通路，Western blot 法检测其对NaHS 诱导的通路下游
蛋白Akt1 和ERK1/2 磷酸化的影响及其对BACE1 蛋白表达变化的调节；ELISA法检测细胞培养液中A茁42 水平的变化。结果
NaHS 在实验浓度范围内呈剂量依赖性下调BACE1mRNA 及蛋白表达，200 μmol/L 时最明显，各NaHS 组与对照组相比，差异
均有统计学意义（ P<0.05）；LY294002 抑制NaHS 诱导的Akt1蛋白磷酸化，削弱NaHS 对BACE1 蛋白的下调作用，其表达在
LY294002 预处理组与NaHS 200 μmol/L组相比，差异具有统计学意义（ P<0.05）；而PD98059 虽能抑制NaHS 导致的ERK1/2
蛋白磷酸化，但对其调节BACE1 蛋白表达无影响，PD98059 预处理组与NaHS 200 μmol/L 组相比，差异无统计学意义（ 跃
0.05）；不同处理条件下的A茁42 表达与BACE1 变化趋势基本一致。结论外源性H2S 下调PC12 细胞BACE1 表达，其机制可
能与PI3-K/Akt 信号通路的激活有关，而与MAPK/ERK1/2 通路无关。