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RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对ECV304细胞增殖和迁移的影响
引用本文:曹阳,黄晓园,马全富,杨漾,庄亮,马丁,周剑峰.RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对ECV304细胞增殖和迁移的影响[J].肿瘤,2008,28(12).
作者姓名:曹阳  黄晓园  马全富  杨漾  庄亮  马丁  周剑峰
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科,武汉,430030
2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,武汉,430030
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划) 
摘    要:目的:探讨利用RNA干扰技术下调Smad4基因表达对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力的影响,初步了解Smad4在血管生成中的作用。方法:设计并合成靶向人Smad4基因的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段siRNA1和siRNA2,脂质体介导转染入人脐静脉内皮细胞株ECV304。应用实时定量RT-PCR和Western印迹法检测转染前后Smad4基因表达水平;应用细胞周期分析和羧乙基锗倍半氧化物(6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)-流式细胞仪检测ECV304细胞转染前后细胞增殖能力的变化;通过单层细胞划痕实验观察细胞转染前后迁移能力的变化。结果:从2条siRNA中成功筛选出1条siRNA,于RNA和蛋白水平可明显下调Smad4基因的表达;ECV304细胞转染Smad4的siRNA后,细胞的增殖和迂移能力明显增强。结论:利用RNA干扰技术能够筛选出高效的特异阻断Smad4基因表达的siRNA;Smad4基因表达下调能够明显促进血管内皮细胞的增殖和迁移。

关 键 词:肿瘤  实验性  RNA干扰  细胞增殖  基因表达  基因  Smad4  细胞  ECV304

Influence of RNA interference-induced silencing Smad4 gene on proliferation and migration of ECV304 cell line
CAO Yang,HUANG Xiao-yuan,MA Ouan-fu,YANG Yang,ZHUANG Liang,MA Ding,ZHOU Jian-feng.Influence of RNA interference-induced silencing Smad4 gene on proliferation and migration of ECV304 cell line[J].Tumor,2008,28(12).
Authors:CAO Yang  HUANG Xiao-yuan  MA Ouan-fu  YANG Yang  ZHUANG Liang  MA Ding  ZHOU Jian-feng
Abstract:
Keywords:Smad4
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