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噬菌体展示技术筛选甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位的研究
引用本文:蔡炯,钟彦伟,荆霞,陈丽,李方,徐东平.噬菌体展示技术筛选甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位的研究[J].解放军医学杂志,2010,35(1).
作者姓名:蔡炯  钟彦伟  荆霞  陈丽  李方  徐东平
作者单位:1. 中国医学科学院北京协和医院核医学科,北京,100730
2. 解放军302医院传染病研究所病毒性肝炎研究室
基金项目:国家自然科学基金(30771993)
摘    要:目的筛选特异性甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位。方法应用噬菌体表面展示技术,以2009年甲型H1N1流感康复患者的血清作为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机环七肽库进行3轮吸附-洗脱-扩增筛选。从顶部琼脂噬菌斑中随机挑取32个克隆至处于对数生长期的大肠埃希菌中培养,采用ELISA,交叉反应以及竞争抑制性实验筛选并鉴定阳性克隆,对阳性克隆进行DNA序列分析,对其编码的展示于噬菌体表面的氨基酸序列与流感病毒血凝素(HA)基因进行同源性比较,确定甲型H1N1流感病毒抗原的模拟表位。结果从随机挑选的32个克隆中得到12个阳性克隆,确定氨基酸序列PLHARLP为甲型H1N1流感病毒抗原的模拟表位,其表位由HA的第52,53,59,60,61,83,271位氨基酸共同构成。结论用噬菌体环七肽库筛选得到甲型H1N1流感病毒的模拟表位,为开展用流感病毒模拟表位探索新的流感防治方法奠定了基础。

关 键 词:流感    流感病毒A型  H1N1亚型  表位  细菌噬菌体  

Screening of mimotopes of swine influenza virus A (HIND by phage display technology
CAI Jiong,ZHONG Yan-wei,JING Xia,CHEN Li,LI Fang,XU Dong-ping.Screening of mimotopes of swine influenza virus A (HIND by phage display technology[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2010,35(1).
Authors:CAI Jiong  ZHONG Yan-wei  JING Xia  CHEN Li  LI Fang  XU Dong-ping
Abstract:Objective To screen the specific antigen mimotopes of influenza A(H1N1)virus by phage display technology,in order to pave a way to develop novel influenza vaccine.Methods Using human convalescent serum of pandemic influenza A(H1N1)in 2009 as solid-phase selective molecule,an artificial synthesized phage randomly displaying cyclic 7-mer peptide was screened with three rounds of absorption-elution-amplification selection.At the end of the third round selection,32 clones were randomly chosen from the top-agar ...
Keywords:influenza  human  influenza A virus  H1N1 subtype  epitopes  bacteriophages  
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