| 肝细胞移植临床前研究：大鼠肝细胞分离,培养和逆转录病毒转导 |
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| 引用本文： | 谢青 陈诗书. 肝细胞移植临床前研究：大鼠肝细胞分离,培养和逆转录病毒转导[J]. 肝脏, 1999, 4(3): 129-133 |
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| 作者姓名： | 谢青 陈诗书 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学附属瑞金医院传染科!200025(谢青，廖丹，周霞秋)，上海第二医科大学人类基因治疗研究中心(陈诗书，钱书兵) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金!（No．39600129） |
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| 摘 要： | 目的建立完善的肝细胞培养系统，研究逆转录病毒载体转移并表达于大鼠原代肝细胞。方法采用表皮生长因子（ＥＧＦ）刺激大鼠原代肝细胞增殖，以表达β－半乳糖苷酶的双顺反子逆转录病毒载体（ｐＧＣＥＮ／β－ｇａｌ）感染肝细胞。Ｘ－ｇａｌ原位染色方法检测肝细胞内ＬａｃＺ的表达，采用ＰＣＲ方法扩增ＮｅｏＲ基因，从ＤＮＡ水平证实逆转录病毒载体整合入肝细胞。结果ＥＧＦ在体外可刺激肝细胞增殖并维持肝细胞功能，肝细胞表达β－半乳糖苷酶基因，肝细胞中可扩增出ＮｅｏＲ基因片断。结论双顺反子逆转录病毒载体可有效介导β－ｇａｌ和ＮｅｏＲ基因表达于大鼠肝细胞，提示可用于标记原代大鼠肝细胞，有利于研究肝细胞移植后移植之肝细胞在体内的寿命、分布及功能。
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| 关 键 词： | 大鼠肝细胞 逆转录病毒载体 肝细胞移植 基因标记 |
Preclinical studies for liver cell transplantation: isolation, culture for rat hepatocytes and retroviral transduction |
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| XIE Qing,LIAO Dan,ZHOU Xiaqiu,et al.. Preclinical studies for liver cell transplantation: isolation, culture for rat hepatocytes and retroviral transduction[J]. Chinese Hepatology, 1999, 4(3): 129-133 |
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| Authors: | XIE Qing LIAO Dan ZHOU Xiaqiu et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rat hepatocytes Retroviral vectors Liver cell transplantation Gene labeling |
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