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改良型混合酶消化法培养小鼠乳腺上皮细胞
引用本文:易琼,王鲁,李圆方,朱伟. 改良型混合酶消化法培养小鼠乳腺上皮细胞[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2011, 15(50). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.50.007
作者姓名:易琼  王鲁  李圆方  朱伟
作者单位:1. 贵州大学动物科学学院,贵州省贵阳市,550025
2. 贵州省生化工程中心,贵州省贵阳市,550025
摘    要:背景:目前采用的A型胶原酶和胰蛋白酶混合酶分离乳腺细胞团的方法操作复杂,实验条件要求高.目的:观察改良型混合酶消化法能否成功进行乳腺上皮细胞的体外培养.方法:采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶(1∶1∶1)混合消化直接用眼科剪剪碎的小鼠乳腺组织,37 ℃振荡消化获取乳腺细胞团,并采用差速贴壁法去除成纤维细胞,将细胞团接种于细胞培养瓶进行培养.结果与结论:倒置显微镜下观察显示,改良型混合酶消化法能获得较多的细胞团,且培养12 h后细胞团绝大多数贴在细胞瓶壁,培养72 h后细胞团完全铺开融合成片,细胞呈典型的铺路石样.免疫荧光细胞化学染色结果显示,培养细胞角蛋白18呈阳性反应.说明应用改良型混合酶消化法能在短时间内获得大量较纯的乳腺上皮细胞.

关 键 词:改良型混合酶消化法  乳腺上皮细胞  角蛋白18  细胞培养  小鼠

Cultivation of mouse mammary epithelial cells by using improved collagenase/trypsin digestion method
Yi Qiong,Wang Lu,Li Yuan-fang,Zhu Wei. Cultivation of mouse mammary epithelial cells by using improved collagenase/trypsin digestion method[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2011, 15(50). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.50.007
Authors:Yi Qiong  Wang Lu  Li Yuan-fang  Zhu Wei
Abstract:
Keywords:
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