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慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞
引用本文:汤浩,项永生,秦玲莎,姜晓丹,徐如祥,陈镇洲.慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞[J].中国组织工程研究与临床康复,2011,15(40):7441-7445.
作者姓名:汤浩  项永生  秦玲莎  姜晓丹  徐如祥  陈镇洲
作者单位:南方医科大学珠江医院神经外科,广东省广州市,510282
基金项目:国家自然科学基金,广东省医学科研基金,广东省科技计划重点专项
摘    要:背景:原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法。目的:验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况。将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况。结果与结论:基因转染48h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减。转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上。提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究。

关 键 词:增强型绿色荧光蛋白  人骨髓基质细胞  慢病毒  转染  体内移植

Enhanced green fluorescent protein gene-modified human bone marrow stromal cells induced by lentivirus
Tang Hao,Xiang Yong-sheng,Qin Ling-sha,Jiang Xiao-dan,Xu Ru-xiang,Chen Zhen-zhou.Enhanced green fluorescent protein gene-modified human bone marrow stromal cells induced by lentivirus[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2011,15(40):7441-7445.
Authors:Tang Hao  Xiang Yong-sheng  Qin Ling-sha  Jiang Xiao-dan  Xu Ru-xiang  Chen Zhen-zhou
Institution:Tang Hao,Xiang Yong-sheng,Qin Ling-sha,Jiang Xiao-dan,Xu Ru-xiang,Chen Zhen-zhou Department of Neurosurgery,Zhujiang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou 510282,Guangdong Province,China
Abstract:BACKGROUND: Transfection of primary culture cells is an important investigation field on cell biology, but the low transfection rate is one of the main obstacles which have limited its development and utility for a long time. Lentivirus transfection has become a good method because of its unique advantages in transfection of primary culture cells. OBJECTIVE: To investigate the feasibility of transfection of human bone marrow stromal cells (hBMSCs) with lentivirus mediated enhanced green fluorescent protein ...
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