人端粒酶逆转录酶启动子调控的真核荧光表达载体的构建与表达 |
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引用本文: | 董翠,阴志刚,王纯耀,张旭东.人端粒酶逆转录酶启动子调控的真核荧光表达载体的构建与表达[J].郑州大学学报(医学版),2010,45(3). |
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作者姓名: | 董翠 阴志刚 王纯耀 张旭东 |
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作者单位: | 1. 郑州大学生物工程系,郑州,450001 2. 郑州大学实验动物中心,郑州,450052 3. 郑州大学第一附属医院肿瘤科,郑州,450052 |
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摘 要: | 目的:克隆人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子,构建真核表达载体pEGFP-C3-hTERTp.方法:PCR方法扩增出hTERTp,依次克隆至pGEM-T Easy载体和重组载体pEGFP-C3上.经酶切和测序鉴定后,重组质粒pEGFP-C3-hTERTp转染人胚肾293A细胞,并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况.结果:成功扩增出276 bp的hTERTp,测序结果与GenBank中hTERT启动子DNA序列完全一致.重组载体pEGFP-C3-hTERTp转染293A细胞能观察到荧光表达.结论:成功构建了hTERT启动子调控的真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-hTERTp,其能够在人胚肾293A细胞中表达.
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关 键 词: | 人端粒酶逆转录酶启动子 真核荧光表达载体 构建 表达 |
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