甘草β-香树酯醇合成酶的多态性对其催化效率的影响研究 |
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作者姓名: | 沈湛云 刘春生 黄建梅 林宏英 苏爽 |
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作者单位: | 北京中医药大学中药学院,北京,100102 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30672615) |
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摘 要: | 目的:分析与高、低甘草酸含量密切相关的β-AS(A-T)基因型和β-AS(G-C)基因型在酿酒酵母中异源表达的情况,比较这2种基因型对所生成的β-香树酯醇产量的影响,从而为甘草分子育种奠定基础。方法:将克隆的甘草β-AS基因亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体pY26中,从大肠杆菌中筛选出含有目的基因的重组质粒PY-β-AS,用醋酸锂法转化到酿酒酵母缺陷型菌株INVScI中,经半乳糖诱导后,收集菌体,用气相色谱/质谱(GC-MS)分析生成的β-香树酯醇的量。结果:甘草β-AS基因所编码的酶能催化酵母内源性2,3-氧化鲨稀生成β-香树酯醇,GC-MS分析显示甘草β-AS(A-T)基因型和β-AS(G-C)基因型所生成的β-香树酯醇的质量分数分别为19.08%,1.40%。结论:甘草β-AS(A-T)基因型的催化效率高于β-AS(G-C)基因型,可为甘草分子育种奠定基础。
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关 键 词: | 甘草 β-香树酯醇合成酶 β-香树酯醇 催化效率 |
收稿时间: | 2010-04-20 |
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