| 体外培养小脑浦肯野神经元转染及条件的优化 |
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| 引用本文： | 邵志华,张军,石红军. 体外培养小脑浦肯野神经元转染及条件的优化[J]. 同济大学学报(医学版), 2008, 29(6) |
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| 作者姓名： | 邵志华 张军 石红军 |
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| 作者单位： | 同济大学基础医学院生物教研室,上海,200092;同济大学基础医学院生物教研室,上海,200092;同济大学基础医学院生物教研室,上海,200092 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨用化学转染试剂体外转染小脑浦肯野神经元的最佳转染条件.方法 体外分离培养E18 d的昆明小白鼠的小脑浦肯野神经元,用lipofectamineTM2000、磷酸钙沉淀试剂、Effectene转染试剂包被质粒分别转染体外培养7 d的浦肯野神经元.另外,用lipofectamineTM2000包被质粒,分别转染7、14、21 d以及28 d浦肯野神经元.每组分为5个样本.48 h后观察绿色荧光蛋白的表达情况,并用台盼兰检测细胞的存活率.结果 (1)3种转染试剂的最高转染率分别为lipofectamineTM2000(19.63±5.76)%、磷酸钙沉淀法(1.84±1.85)%、Effectene(1.48±1.38)%.lipofectamineTM2000与其他两种方法的转染率均有显著差异.(2)2 μl的lipofectamineTM2000的转染效率为(15.11±4.01)%,细胞存活率与对照组没有明显差异,为(92.98±2.10)%.(3)培养早期(7 d、14 d)的浦肯野神经元损伤小,与对照组没有明显差异.结论 该实验首次证实了lipofectamineTM2000能有效地转染体外培养的小脑浦肯野神经元.不同的发育阶段对转染效率也有较大的影响,lipofectamineTM2000比较适合早期的浦肯野神经元转染.
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| 关 键 词： | 浦肯野神经元 转染 优化 |
Experimental study on optimization of transfection on Purkinje cells of cerebellum in vitro |
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| SHAO Zhi-hua,ZHANG Jun,SHI Hong-jun. Experimental study on optimization of transfection on Purkinje cells of cerebellum in vitro[J]. Journal of Tongji University(Medical Science), 2008, 29(6) |
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| Authors: | SHAO Zhi-hua ZHANG Jun SHI Hong-jun |
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| Affiliation: | SHAO Zhi-hua,ZHANG Jun,SHI Hong-jun (Dept.of Biology,Medical College,Tongji University,Shanghai 200092,China) |
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| Abstract: | Objective To discuss the best condition of chemical transfection agents for transfection on Purkinje cells of cerebellum in vitro.Methods Cerebellum Purkinje cell of Kun Ming mice at embryo 18 d were isolated and cultured in vitro.Plasmid covered with lipofectamine~(TM) 2000,calcium phosphate precipitation reagents,effectene transfection reagents were transfected to cerebellum Purkinje cell after cultured 7 d in vitro respectively.At the same time,plasmid covered by lipofectamine~(TM) 2000 was transfected t... |
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| Keywords: | Purkinje cell transfection optimization |
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