| 铁皮石斛HDS基因的克隆与初步表达分析 |
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| 引用本文： | 王翔,吴林松,吴秋菊,林毅,蔡永萍,樊洪泓.铁皮石斛HDS基因的克隆与初步表达分析[J].中草药,2016,47(5):803-809. |
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| 作者姓名： | 王翔 吴林松 吴秋菊 林毅 蔡永萍 樊洪泓 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036 |
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| 基金项目： | 安徽省教育厅自然科学重点项目(KJ2015A005);江淮地区大学农业科技服务模式关键技术集成与示范(2013BAD20B09) |
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| 摘 要： | 目的从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆4-羟基-3-甲基-2-E-丁烯基-1-焦磷酸合成酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate synthase,HDS)基因,在大肠杆菌中诱导融合蛋白,并探究该基因在铁皮石斛不同组织中的表达规律。方法采用RT-PCR和RACE等方法获取铁皮石斛HDS(Do HDS)的c DNA全长,利用相关软件和在线网站进行生物信息学分析,使用Real-Time PCR分析Do HDS在不同组织的表达特征,构建原核表达载体p ET-28a(+)-Do HDS,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果成功获得Do HDS的c DNA全长序列,Gen Bank登录号为KJ161312,全长2 666 bp,ORF为2 238 bp,编码745个氨基酸。Do HDS在各组织中均有表达,在茎中表达量最高,为原球茎的5倍;SDS-PAGE结果显示诱导产物为1个相对分子质量(82 700)与理论值相符的融合蛋白。结论克隆了Do HDS的c DNA全长序列,探究其在不同组织中的表达模式,建立了原核表达体系,为后续研究Do HDS的功能提供了一定的理论基础。
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| 关 键 词： | 铁皮石斛 4-羟基-3-甲基-2-E-丁烯基-1-焦磷酸合酶 基因克隆 表达分析 |
| 收稿时间： | 2015/8/19 0:00:00 |
Cloning and preliminary expression analysis on HDS gene in Dendrobium officinale |
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| WANG Xiang,WU Lin-song,WU Qiu-ju,LIN Yi,CAI Yong-ping and FAN Hong-hong.Cloning and preliminary expression analysis on HDS gene in Dendrobium officinale[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2016,47(5):803-809. |
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| Authors: | WANG Xiang WU Lin-song WU Qiu-ju LIN Yi CAI Yong-ping and FAN Hong-hong |
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| Institution: | School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China;School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China;School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China;School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China;School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China;School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dendrobium officinale Kimura et Migo 4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate synthase gene cloning expression analysis |
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