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口服型VEGFR-2 DNA疫苗的研制及其对小鼠的免疫效应
引用本文:王熙才,伍治平,陈艳,金从国,刘馨,周永春,左曙光.口服型VEGFR-2 DNA疫苗的研制及其对小鼠的免疫效应[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2008,15(4).
作者姓名:王熙才  伍治平  陈艳  金从国  刘馨  周永春  左曙光
作者单位:昆明医学院,第三附属医院,云南省肿瘤医院,肿瘤研究所,昆明,650118
基金项目:云南省科技厅-昆明医学院联合专项基金
摘    要:目的:血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial factor recepto-2,VEGFR-2)在肿瘤生长和转移过程中起着重要作用,制备口服型VEGFR-2 DNA疫苗并研究其生物免疫效应.方法:采用基因重组技术构建VEGFR-2胞外区基因表达载体pcDNA3.1-VR-2, DNA序列分析证实后,脂质体法转染COS-7细胞, Western blotting检测其VEGFR蛋白表达;以氯化钙法将pcDNA3.1-VR-2转化减毒沙门菌SL3261,制备口服型VEGFR-2 DNA疫苗.口服型疫苗免疫C57BL/6小鼠,ELISA法检测免疫后小鼠外周血VEGFR-2抗体水平,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞对小鼠血管内皮细胞的体外杀伤活性.结果:成功制备口服型VEGFR-2 DNA疫苗.ELISA法检测显示,疫苗组小鼠抗体滴度随着免疫时间和免疫次数的增加而增高,在免疫6周后产生了高水平抗VEGFR-2 IgG类抗体(1.07±0.018),明显高于生理盐水组(0.14±0.033)和质粒对照组(0.14±0.038),差异均有统计学意义(F=853.17,P=0.000).MTT法检测显示,疫苗组小鼠脾淋巴细胞对靶细胞MS1的杀伤率随着效靶比的增加而增加,在效靶比8∶1时CTL活性(89.38±1.51)明显高于生理盐水组(15.17±2.54)和空质粒对照组(12.99±4.31),差异有统计学意义(F=315.42,P=0.000).结论:成功制备了口服型VEGFR-2 DNA疫苗,该疫苗可激活小鼠特异性的细胞免疫和体液免疫,为进一步抗肿瘤研究奠定了基础.

关 键 词:血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)  减毒沙门菌  口服型DNA疫苗  细胞免疫  体液免疫

Preparation of an oral DNA vaccine based on VEGFR-2 and investigation of its immune effects in mice
WANG Xi-cai,WU Zhi-ping,CHEN Yan,JIN Cong-guo,LIU Xin,Zhou Yong-chun,ZUO Shu-guang.Preparation of an oral DNA vaccine based on VEGFR-2 and investigation of its immune effects in mice[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2008,15(4).
Authors:WANG Xi-cai  WU Zhi-ping  CHEN Yan  JIN Cong-guo  LIU Xin  Zhou Yong-chun  ZUO Shu-guang
Abstract:
Keywords:
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