丙肝病毒（HCV）及乙肝病毒（HBV）双表达栽体的构建及表达

目的：为探索HCV/HBV高效联合基因免疫策略，构建具有2套独立表达单元的HCV/HBV真核表达载体。方法：分别将与HCV核心区基因互CDNA和HBC核心区基因克隆于具有2套独立表达单元的真核表达载体pRSC的巨细胞病毒启动子和RSV启动子下游，称为PRSC-HBV/HCV，转染SP2/0细胞，通过免疫荧光和Western印迹法观测蛋白的表达，免疫Balb/c小鼠，用酶联免疫小鼠体液免疫应答。结果：PRSC-HBV/HCV转染SP2/0细胞可见HBCAG及HCV核蛋白染色阳性荧光细胞，SDS-Page电泳显示在14KD及21KD处均可见蛋白条带，与HBCAG及HCV核蛋白的理论预期值一致，Western印迹分析显示在14KD及21KD处可见特异性的蛋白条带。5只免疫鼠中全部 出现抗-HCV及抗-HBV抗体，而对照组全阴性。结论：PRSC-HBV/HCV可分别表达HBCAG与HCV核蛋白，免疫Balb/c小鼠后诱导其体液免疫应答，为进一步开展HCV/HBV联合基因免疫尊定了实验基础。