电压门控型钾通道蛋白Kv1.5抗血清的制备及特性鉴定 |
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引用本文: | 于学薇,李淑珍,鄢成伟,唐晓波.电压门控型钾通道蛋白Kv1.5抗血清的制备及特性鉴定[J].哈尔滨医科大学学报,2010,44(4). |
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作者姓名: | 于学薇 李淑珍 鄢成伟 唐晓波 |
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作者单位: | 哈尔滨医科大学药学院,生物制药学教研室,黑龙江,哈尔滨,150081 |
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基金项目: | 黑龙江省教育厅科学技术研究项目,哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目 |
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摘 要: | 目的 制备电压门控型钾通道蛋白Kv 1.5的多克隆抗体,对其特性进行鉴定.方法 利用生物信息学方法分析Kv 1.5蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择一段8个氨基酸序列,据此合成Kv 1.5多肽片段,并将其与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联作为免疫抗原,免疫新西兰白兔制备抗Kv 1.5抗血清.辛酸-硫酸铵法纯化抗血清,对纯化后的抗血清进行 ELISA、Western blot鉴定.结果 成功获得抗Kv 1.5合成肽的抗血清,该抗血清效价为1∶ 64 000,可与Kv 1.5合成肽及天然Kv 1.5蛋白出现特异性反应,该抗血清识别的相应抗原的相对分子质量(Mr)为59 kD.同时,Western blot结果显示,所制备的抗血清能识别大鼠心脏天然Kv 1.5蛋白.结论 合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗血清,并且制备的抗血清经 ELISA、Western blot鉴定后特异性较好.
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关 键 词: | 合成肽 多克隆抗体 |
Preparation and identification of polyclonal antiserum against Kv 1.5 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Kv 1 5 |
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