| 人CDK2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 黄宪章,王前,郑磊,陈晓,熊石龙,包杰,丁海明,黄妩姣,庄俊华.人CDK2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J].中国病理生理杂志,2008,24(6):1246-1248. |
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| 作者姓名： | 黄宪章 王前 郑磊 陈晓 熊石龙 包杰 丁海明 黄妩姣 庄俊华 |
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| 作者单位： | 1南方医科大学南方医院检验医学中心，广东 广州 510515；2广东省中医院检验科，广东 广州 510120 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金
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广东省科学计划课题 |
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| 摘 要： | 目的： 构建人细胞周期素依赖蛋白激酶2(CDK2)基因RNA干扰慢病毒载体。〖HJ1.8mm〗方法: 利用Invitrogen公司在线软件设计人CDK2（NM001798）shRNA序列，退火形成ds oligo后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端，测序，再与慢病毒载体重组，测序鉴定，在脂质体的介导下将慢病毒的包装混合物和CDK2基因重组慢病毒载体转染293FT细胞，包装成病毒后，收集细胞培养上清液，测定病毒滴度。结果: 测序证实pENTRTM/U6- CDK2-shRNA为阳性克隆，与慢病毒载体重组后测序结果显示也为阳性克隆，CDK2基因重组慢病毒载体传染293FT细胞后48 h, 细胞培养上清液，病毒的滴度为6×108TU/L。结论: 成功构建人CDK2基因RNAi慢病毒载体，为研究CDK2在自身免疫病中的应用提供了稳定的转染细胞载体。
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| 关 键 词： | 基因 CDK2 RNA干扰 慢病毒载体 |
| 收稿时间： | 2008-1-18 |
| 修稿时间： | 2008-3-20 |
Construction and identification of RNAi lentivirus vector of human CDK2 gene |
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| HUANG Xian-zhang,WANG Qian,ZHENG Lei,CHEN Xiao,XIONG Shi-long,BAO Jie,DING Hai-ming,HUANG Wu-jiao,ZHUANG Jun-hua.Construction and identification of RNAi lentivirus vector of human CDK2 gene[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2008,24(6):1246-1248. |
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| Authors: | HUANG Xian-zhang WANG Qian ZHENG Lei CHEN Xiao XIONG Shi-long BAO Jie DING Hai-ming HUANG Wu-jiao ZHUANG Jun-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Genes CDK2 RNA interference Lentivirus vector |
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