| 氟脲嘧啶促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF的表达 |
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| 引用本文： | 杜 楠,裴雪涛,孙君重,付 艳,赵 晖,王希良.氟脲嘧啶促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF的表达[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2008,15(5):428-432. |
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| 作者姓名： | 杜 楠 裴雪涛 孙君重 付 艳 赵 晖 王希良 |
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| 作者单位： | 1. 解放军总医院,第一附属医院,肿瘤科,北京,100037
2. 军事医学科学院,野战输血研究所,北京,100037 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，解放军总医院第一附属医院新技术重大项目 |
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| 摘 要： | 目的：探索氟脲嘧啶（5-FU）对Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞造血因子GM-CSF表达的促进作用,以寻找促进化疗所致造血损伤恢复的方法。方法：构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因的重组真核表达载体（pCIneo-Egr-1-EGFP-IRES-GM-CSF,Egr-EG）,通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳性克隆（HFCL/EG）。采用RT-PCR检测5-FU处理的HFCL/EG细胞GM-CSFmRNA表达,用FACS和倒置荧光显微镜观察5-FU诱导HFCL/EG细胞EGFP表达的阳性细胞。在加入5-FU的HFCL/EG细胞培养体系中,用ELISA方法检测GM-CSF的含量;将从脐血中分离的单个核细胞接种于5-FU处理后的HFCL/EG培养上清液培养基中,观察其对GM-CFU的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸检测5-FU通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性。结果：构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体Egr-EG,获得其转染细胞HFCL/EG。在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,RT-PCR显示其GM-CSFmRNA表达增强,流式细胞术证实有EGFP的显著表达。在5-FU处理后,HFCL/EG细胞培养上清液GM-CSF含量和GM-CFU形成数量分别较未处理细胞能明显增高（P〈0.01）;在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,N-乙酰半胱氨酸能明显减少GM-CSF含量（P〈0.01）。结论：5-FU能促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF基因的表达,从而对化疗后的造血损伤产生一定的恢复作用。
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| 关 键 词： | Egr-1 5-氟脲嘧啶 粒-巨噬细胞集落刺激因子 骨髓基质细胞 活性氧中间物 |
| 收稿时间： | 2008/7/19 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2008/8/16 0:00:00 |
5-fluorouracil enhances Egr 1 promoter upregulate expression of granulocyte macrophage colony stimulating factor in human bone marrow stromal cells |
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| DU Nan,PEI Xue-tao,SUN Jun zhong,FU Yan,ZHAO Hui and WANG Xi liang.5-fluorouracil enhances Egr 1 promoter upregulate expression of granulocyte macrophage colony stimulating factor in human bone marrow stromal cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2008,15(5):428-432. |
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| Authors: | DU Nan PEI Xue-tao SUN Jun zhong FU Yan ZHAO Hui and WANG Xi liang |
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| Institution: | Department of Oncology, The First Affiliated Hospital of General Hospital of PLA, Beijing 100037, China;Institute of Field Blood Transfusion, Academy of Military Medical Sciences of PLA, Beijing 100037, China;Department of Oncology, The First Affiliated Hospital of General Hospital of PLA, Beijing 100037, China;Department of Oncology, The First Affiliated Hospital of General Hospital of PLA, Beijing 100037, China;Department of Oncology, The First Affiliated Hospital of General Hospital of PLA, Beijing 100037, China;Department of Oncology, The First Affiliated Hospital of General Hospital of PLA, Beijing 100037, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Egr-1 |
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