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木犀草苷人工抗原合成及免疫原性鉴定
引用本文:张波,詹志来,康利平,袁媛,黄璐琦,丁凤伟,南铁贵. 木犀草苷人工抗原合成及免疫原性鉴定[J]. 中国中药杂志, 2015, 40(22): 4359-4363
作者姓名:张波  詹志来  康利平  袁媛  黄璐琦  丁凤伟  南铁贵
作者单位:山东中医药大学药学院, 山东济南 250355;中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,山东明仁福瑞达制药股份有限公司, 山东济南 250104,中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700
基金项目:国家自然科学基金项目(81373959);国家中医药行业科研专项(201407003)
摘    要:金银花是常用大宗中药材之一,市场流通量大,但存在较多质量问题,建立一种金银花质量快速检测方法具有重要意义。木犀草苷是其质量控制指标之一,目前木犀草苷的含量检测主要以仪器检测为主,无法满足简单、快速、高通量的需求。酶联免疫检测法(ELISA)则具有灵敏度高、操作简单、设备仪器需求少、通量高等优点,是实现中药材有效成分快速检测的有效手段之一。该研究以木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷为原料,通过活泼酯法,分别与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原及包被抗原;紫外分光光度法检测半抗原与载体蛋白的偶联比,分别为3.7:1(LG-BSA)和1.0:1(LG-OVA);免疫原(LG-BSA)免疫Bal b/c雌性小鼠,制备抗血清,ELISA检测抗血清效价并建立血清特异性标线。结果显示血清效价>2000,以抗血清建立特异性标线,IC50=298.7μg·L-1,标线范围18.4~4852.4μg·L-1,表明所制备的完全抗原免疫原性良好。

关 键 词:木犀草苷  人工抗原  免疫原性  酶联免疫吸附检测法
收稿时间:2015-06-06

Preparation and immunogenicity identification of artificial antigen for luteoloside
ZHANG Bo,ZHAN Zhi-lai,KANG Li-ping,YUAN Yuan,HUANG Lu-qi,DING Feng-wei and NAN Tie-gui. Preparation and immunogenicity identification of artificial antigen for luteoloside[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2015, 40(22): 4359-4363
Authors:ZHANG Bo  ZHAN Zhi-lai  KANG Li-ping  YUAN Yuan  HUANG Lu-qi  DING Feng-wei  NAN Tie-gui
Affiliation:College of Pharmacy, Shan Dong University of Traditional Chinese Medicine, Ji'nan 250355, China;State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences Beijng 100700, China,State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences Beijng 100700, China,State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences Beijng 100700, China,State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences Beijng 100700, China,State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences Beijng 100700, China,Shandong C. P. Freda Pharm Co., Ltd., Ji'nan 250104, China and State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences Beijng 100700, China
Abstract:
Keywords:luteoloside  artificial antigen  immunogenicity  ELISA
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