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细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建
引用本文:孙德旭,秦苏萍,王晓天,李小翠,刘志强. 细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建[J]. 山东医药, 2013, 53(19): 11-14
作者姓名:孙德旭  秦苏萍  王晓天  李小翠  刘志强
作者单位:1. 徐州医学院人体解剖学教研室,江苏徐州,221004
2. 徐州医学院病原微生物学教研室
3. the University of Texas Health Science Center at San Antonio
摘    要:目的 构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞.方法 分别克隆FGF18基因启动子区域的5’同源臂和3’同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒.提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区.结果 经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC.结论 成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产.

关 键 词:FGF18  绿色荧光蛋白  细菌人工染色体  同源重组

Construction of a recombinant BAC expressing FGF18-GFP
SUN De-xu , QIN Su-ping , WANG Xiao-tian , LI Xiao-cui , LIU Zhi-qiang. Construction of a recombinant BAC expressing FGF18-GFP[J]. Shandong Medical Journal, 2013, 53(19): 11-14
Authors:SUN De-xu    QIN Su-ping    WANG Xiao-tian    LI Xiao-cui    LIU Zhi-qiang
Abstract:
Keywords:
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