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| 天花粉蛋白抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长及逆转syk基因甲基化的研究 | |
| 引用本文： | 华芳,单保恩,赵连梅,姚志刚,彭华.天花粉蛋白抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长及逆转syk基因甲基化的研究[J].肿瘤,2009,29(10). |
| 作者姓名： | 华芳 单保恩 赵连梅 姚志刚 彭华 |
| 作者单位： | 1. 河北医科大学第四医院科研中心,石家庄,050011 2. 河北医科大学病理研究室,石家庄,050017 3. 河北医科大学第四医院检验科,石家庄,050011 |
| 基金项目： | 1.国家自然科学基金资助项目(编号:30772752)2.河北省自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的:研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和诱导细胞凋亡过程中脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,syk)基因甲基化状态的改变,以寻找新的去甲基化药物.方法:采用MTT法分析TCS对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Giemsa染色法观察TCS作用后细胞形态学的变化,FCM检测不同浓度TCS作用48 h后MDA-MB-231细胞凋亡和细胞周期分布情况,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测MDA-MB-231细胞经TCS作用前后syk基因甲基化状态的改变,RT-PCR方法分析TCS作用后MDA-MB-231细胞中syk、Dnmts和MBD2 mRNA表达量的变化,比色法检测TCS对MDA-MB-231细胞DNA甲基转移酶活性的影响.结果:TCS体外对MDA-MB-231细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性;TCS可诱导MDA-MB-231细胞出现空泡样变性、核固缩和核碎裂等细胞凋亡形态学改变,能使MDA-MB-231细胞凋亡并可诱导细胞生长周期阻滞,凋亡率明显高于对照组(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性.TCS可以逆转MDA-MB-231细胞syk基因启动子区甲基化状况;MDA-MB-231细胞syk mRNA表达阴性,经TCS作用后,syk mRNA表达阳性;MDA-MB-231细胞经TCS作用48 h前后Dnmts和MBD2 mRNA表达量没有明显变化(P>0.05),但Dnmts活性降低.结论:TCS在抑制MDA-MB-231细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中对syk基因具有明显的去甲基化作用,因而可能成为新型的去甲基化药物. |
| 关 键 词： | 乳腺肿瘤 天花粉蛋白 蛋白质酪氨酸激酶 DNA甲基化 细胞增殖 细胞凋亡 基因 |
Trichosanthin inhibited the proliferation of MDA-MB-231 cells and reversed the methylation of syk gene |
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| Abstract: | |
| Keywords: | syk |
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