用于发展合成口服疫苗的大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的表位图

不耐热肠毒素B亚单位(LT-B)含有引起LT-特异性抗体应答的大部分优势免疫表位.作者用天然LT和重组LT-B免疫小鼠,检测分泌物和血清中抗LT-B抗体应答的特性,并确定抗LT-B的T细胞或B细胞的表位图,以期构建既能刺激粘膜又能产生血清抗LT-B抗体应答的合成肽.作者从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)H10407株及大肠杆菌K-12株JM83转化体中分别制备LT及重组LT-B,并在都柏林沙门菌中表达重组LT-B.小鼠或于0天口服含25μgLT的磷酸缓冲盐水(PBS)0.25ml,或于0、1和2天各口服含10~(10)CFU都柏林沙门菌EL23株的PBSO.25ml,或于0、7和14天各免疫含50μg合成肽的PBSO.25ml.采集粪浸液及血清,用ELISA测定抗LT-B抗体.体外刺激LT-B特异性T细胞以评估LT-B特异性T细胞的增殖和细胞因子分布.通过细胞因子特异性ELISA检测由LT