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shRNA干扰AKT基因对Jeko-1细胞增殖、凋亡及Notch1信号通路的影响
引用本文:朱波,黄轶群. shRNA干扰AKT基因对Jeko-1细胞增殖、凋亡及Notch1信号通路的影响[J]. 中国实验血液学杂志, 2015, 23(3): 679-683
作者姓名:朱波  黄轶群
作者单位:1. 厦门大学附属第一医院检验科,福建厦门,361003
2. 福建医科大学附属漳州市医院血液内科,福建漳州,363000
摘    要:目的:探讨RNA干扰沉默AKT基因对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的增殖、凋亡及Notch1信号通路的影响。方法:设计针对AKT基因短发夹RNA,将其连入pGPU6/GFP/Neo质粒中,构建AKT shRNA真核表达载体,经脂质体转染入Jeko-1细胞,应用RQ-PCR及Western blot鉴定其干扰效果,MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,Western blot检测凋亡相关蛋白信号及通路相关蛋白p-AKT、Notch1、HES1的变化。结果:AKT shRNA转染Jeko-1细胞后,AKT的mRNA和蛋白表达均明显下降,有统计学意义(P0.05);转染组细胞增殖率明显低于Neg-shRNA组和空白对照组(P0.05),AKT shRNA传染48 h后,凋亡率为(37.72±4.39)%,而NegshRNA组和空白对照组分别为(2.62±1.53)%、(1.57±0.42)%,差异有统计学意义(P0.01);凋亡相关蛋白BCL-2表达下降,而BAX、caspase-3、caspase-9表达上升;PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-AKT磷酸化水平下降、Notch1信号通路相关蛋白Notch1、HES1表达下调。结论:干扰沉默AKT基因可抑制套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是特异性抑制PI3K/AKT信号通路也能下调Notch1信号通路的活性。

关 键 词:Jeko-1细胞  AKT  RNA干扰  PI3K/ AKT信号通路  Notch1信号通路

Effects of Silencing AKT Gene by shRNA on Proliferation,Apoptosis and Notch1 Signal Pathway in Jeko-1 Cells
ZHU Bo , HUANG Yi-Qun. Effects of Silencing AKT Gene by shRNA on Proliferation,Apoptosis and Notch1 Signal Pathway in Jeko-1 Cells[J]. Journal of experimental hematology, 2015, 23(3): 679-683
Authors:ZHU Bo    HUANG Yi-Qun
Abstract:
Keywords:Jeko-1 cell  AKT  RNA interference  PI3K/AKT signaling pathway  Notch1 signaling pathway
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
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