| 分泌性表达融合蛋白85B-ESAT-6重组卡介苗的构建和表达 |
| |
| 引用本文： | 刘洪波,吴少庭,蔡昌学,甘燕,秦莉.分泌性表达融合蛋白85B-ESAT-6重组卡介苗的构建和表达[J].热带医学杂志,2006,6(10):1064-1067. |
| |
| 作者姓名： | 刘洪波 吴少庭 蔡昌学 甘燕 秦莉 |
| |
| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院病原生物学系,武汉,430030
2. 深圳市疾病预防控制中心分子生物室,深圳,518020 |
| |
| 摘 要： | 目的构建分泌性表达融合蛋白85B-ESAT-6重组卡介苗。方法PCR扩增结核分枝杆菌热休克蛋白60(hsp60)的调控序列和合成T4转录终止序列,分别定向克隆入pBCG2000载体的多克隆位点的上下游,得到E.coli-Mycobacterium穿梭载体质粒pBCG3000。PCR分别扩增出结核分枝杆菌分泌性抗原Ag85B的全编码序列及ESAT-6基因,然后将两基因融合插入pBCG3000载体的hsp60启动子下游得到pBCG3000-85B-ESAT-6分泌性表达质粒。用电穿孔法将pBCG3000-85B-ESAT-6质粒转化BCG细胞,得到重组卡介苗。重组卡介苗经热诱导后,SDS-PAGE电泳和Westernblotting鉴定融合蛋白85B-ESAT-6的表达及其免疫学活性。结果通过PCR、酶切以及测序鉴定,pBCG3000-85B-ESAT-6表达质粒构建完全正确,SDS-PAGE电泳未能直接观察到表达的融合蛋白条带,用ESAT-6蛋白的多抗血清通过Westernblotting证实了该蛋白主要分泌性表达于胞外并具有免疫学活性。结论分泌性表达融合蛋白85B-ESAT-6重组卡介苗构建成功。
|
| 关 键 词： | 融合蛋白 Ag85B ESAT-6 重组卡介苗 穿梭质粒 |
| 文章编号： | 1672-3619（2006）10-1064-04 |
| 收稿时间： | 2006-05-13 |
| 修稿时间： | 2006-07-09 |
Construction of A Recombinant BCG Vaccine Expressing the Secretory Form Fusion Protein 85B-ESAT-6 |
| |
| LIU Hong-bo,WU Shao-ting,CAI Chang-xue,GAN Yan,QIN Li.Construction of A Recombinant BCG Vaccine Expressing the Secretory Form Fusion Protein 85B-ESAT-6[J].Journal Of Tropical Medicine,2006,6(10):1064-1067. |
| |
| Authors: | LIU Hong-bo WU Shao-ting CAI Chang-xue GAN Yan QIN Li |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | fusion protein Ag85B ESAT-6 recombinant BCG shuttle plasmid |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
