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三维培养牙髓间充质细胞外泌体微小RNA表达谱分析
引用本文:艾晓青,窦磊,乔新,杨德琴. 三维培养牙髓间充质细胞外泌体微小RNA表达谱分析[J]. 国际口腔医学杂志, 2022, 0(1): 27-36
作者姓名:艾晓青  窦磊  乔新  杨德琴
作者单位:重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(31970783);国家自然科学基金青年基金(81800958)。
摘    要:目的分析并比较二维(2D)与三维(3D)培养条件下人牙髓间充质细胞(DPSCs)外泌体(Exo)微小RNA (miRNA)的表达谱。方法2D与3D条件下分别培养DPSCs,提取细胞Exo,采用透射电子显微镜、蛋白质免疫印迹及纳米颗粒追踪分析等方法观察并鉴定;通过高通量测序筛选差异表达miRNA,采用Dr.Tom系统及TargetScan网站进行生物信息学分析及组织再生修复相关靶基因预测。结果 3D培养下收集的DPSC-Exo均呈现"茶托样"双层膜结构,CD63和CD9表达阳性,粒径分布符合外泌体特征,与2D培养的DPSC-Exo一致。高通量测序共计检测外泌体来源miRNA 253个,其中3D组表达222个,特有表达99个;与2D组相比,表达显著差异60个[︱log2(3D/2D)︱≥1,Qvalue≤0.001]。差异miRNA主要参与的生物学过程与分子功能分别为细胞过程和结合;京都基因与基因组数据库(KEGG)通路富集分析显示在代谢通路有显著富集。miR-302的候选靶基因有成纤维细胞生长因子(FGF) 19和表皮生长因子受体等;miR-24-3p可能靶向神经元...

关 键 词:三维培养  牙髓间充质细胞  外泌体测序  微小RNA

MicroRNA profile of exosomes derived from dental pulp stromal cells under three-dimensional culture condition
Ai Xiaoqing,Dou Lei,Qiao Xin,Yang Deqin. MicroRNA profile of exosomes derived from dental pulp stromal cells under three-dimensional culture condition[J]. Journal of International Stomatology, 2022, 0(1): 27-36
Authors:Ai Xiaoqing  Dou Lei  Qiao Xin  Yang Deqin
Affiliation:(Dept.of Cariology and Endodontics,Stomatological Hospital of Chong qing Medical University,Chongqing Key Laboratory of Oral Diseases and Biomedical Sciences,Chongqing Municipal Key Laboratory of Oral Biomedical Engineering of Higher Education,Chongqing 401147,China)
Abstract:
Keywords:three-dimensional culture  dental pulp stromal cells  exosomes sequencing  microRNA
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