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重组水蛭素Ⅲ的中试工艺研究
引用本文:陆霞,黄晓东,汤沛霈,欧瑜,吴梧桐.重组水蛭素Ⅲ的中试工艺研究[J].药物生物技术,2007,14(6):420-423.
作者姓名:陆霞  黄晓东  汤沛霈  欧瑜  吴梧桐
作者单位:中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009
基金项目:高等学校博士学科点专项科研项目
摘    要:从大肠杆菌中大规模纯化重组水蛭素Ⅲ,进行重组水蛭素Ⅲ中试发酵工艺和纯化中试工艺研究,连续大量纯化3批,并对纯化终产品进行鉴定。通过菌种活化,一级、二级种子液制备,30L发酵罐补料-批式发酵水蛭素产量达到6000ATU/ml,发酵液经还原性SDS-PAGE分析表明在14000u处有单一条带,为重组水蛭素Ⅲ二聚体。经大孔树脂层析、DEAE-纤维素层析、制备型反相高效液相层析等3步纯化后重组水蛭素Ⅲ的比活达8270ATU/mg。经分析型反相高效液相色谱分析,纯度达95%以上,总收率达到39%以上。通过实验建立了稳定的发酵和纯化工艺流程。

关 键 词:重组水蛭素Ⅲ  发酵  纯化  中试工艺
文章编号:1005-8915(2007)06-0420-04
收稿时间:2007-05-15
修稿时间:2007-06-07

Large-Scale Preparation of Recombinant Hirudin Ⅲ
LU Xia, TANG Pei-pei, OU Yu, WU Wu-Tong.Large-Scale Preparation of Recombinant Hirudin Ⅲ[J].Pharmaceutical Biotechnology,2007,14(6):420-423.
Authors:LU Xia  TANG Pei-pei  OU Yu  WU Wu-Tong
Abstract:
Keywords:
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