应用共聚焦激光扫描技术研究阿片受体介导胞内Ca2+增高的调节机制

目的　观察阿片激动剂急性和长时程作用于稳定表达 i NOS基因的 NG- L NCXi NOS细胞 ,对细胞内游离钙 (Ca2 ]i)的影响及 G-蛋白的调节作用。方法　应用共聚焦显微镜和荧光探针 Fluo- 3,监测单细胞 Ca2 ]i 含量变化。结果　 δ-阿片激动剂 DPDPE和吗啡急性刺激细胞诱发 Ca2 ]i 增加 ,纳洛酮对其起翻转作用 ;用百日咳毒素预处理细胞后 ,吗啡急性刺激不能引起 Ca2 ]i 增加 ;DPDPE和吗啡长时程处理细胞 ,再用相应的阿片激动剂急性刺激也造成 Ca2 ]i 增加 ,但 Ca2 ]i 增加水平较低 ,用纳洛酮戒断造成 Ca2 ]i 明显增加。结论　阿片激动剂诱发Ca2 ]i 增加是由阿片受体介导的 ,受对 PTX敏感的 G-蛋白调节 ,当细胞发生阿片耐受和依赖时 ,表现为受体介导 Ca2 系统的脱敏现象。

Mechanisms of Opioid Receptor-induced Elevation in Intracellular Calcium by Confocal Laser Scanning Microscopy