摘 要: | 目的应用健脾清热活血方含药血清干预人结肠癌SW480细胞,观察PI3K-Akt-m TOR通路相关指标表达变化,探讨其防治结肠癌的可能机制。方法制备健脾清热活血方含药血清,应用高效液相色谱法(HPLC)测定有效成分。体外培养人结肠癌SW480细胞并分为治疗组、对照组和空白组,治疗组分别予不同浓度(5%,10%,15%)健脾清热活血方含药血清,对照组予LY294002,空白组予胎牛血清。应用Western Blot技术及荧光定量PCR检测人结肠癌SW480细胞P85、P110、P-Akt1、m TOR及EGFR、CDK1的蛋白和基因表达水平。结果人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、甘草酸铵为健脾清热活血方含药血清主要有效成分。与空白组相比,治疗组P110、P-Akt、m TOR、EGFR、CDK1基因表达呈下降趋势,差异有统计学意义(P 0. 05);治疗组P110、P-Akt、P85、EGFR、CDK1蛋白表达呈下降趋势,但仅P85、EGFR、CDK1蛋白表达,差异有统计学意义(P 0. 05),而治疗组与空白组P85基因和P110、m TOR、P-Akt蛋白表达无差异(P﹥0. 05)。结论健脾清热活血方含药血清可能通过介导PI3K-Akt-m TOR通路,下调EGFR、CDK1表达,达到防治结肠癌的效用。
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