| 摘 要： | 目的探讨微小RNA(miRNA)-182对肺癌细胞转移和侵袭的影响及其相关机制。方法采用荧光定量PCR方法检测肺癌细胞系和组织标本中miRNA-182表达情况;对miRNA-182表达情况与肺癌临床病理特征关系进行分析;通过Boyden小室分析和伤口愈合实验检测miRNA-182对肺癌细胞转移和侵袭能力的影响;生物信息学方法预测miRNA-182可能的靶基因,并采用荧光素酶报告基因实验验证预测的靶基因E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)是miRNA-182的靶基因;Western印迹方法检测ZEB2、E-钙黏蛋白和波形蛋白的表达情况。结果四种肺癌细胞系miRNA-182mRNA的表达情况为高转移能力的肺癌细胞系95D和L9981其miRNA-182 mRNA表达显著低于转移能力较弱的肺癌细胞系NL9980或95C(P0.05),且同原发性肺癌组织相比,淋巴结转移癌组织中miRNA-182表达亦显著下调(P0.05);临床病理特征关系分析结果显示,miRNA-182表达仅与是否存在淋巴结转移相关。转染miRNA-182可显著抑制肺癌细胞系95D和L9981的转移(P0.05),同时,转染miRNA-182可显著抑制肺癌细胞系95D和L9981的侵袭能力(P0.05),而转染miRNA-182抑制剂可增加肺癌细胞系95D和L9981的侵袭能力(P0.05)。生物信息学预测显示ZEB2为miRNA-182的功能性靶基因,且得到荧光素报告实验结果证实。Western印迹结果显示转染miRNA-182可显著抑制肺癌细胞系95D和L9981中ZEB2和波形蛋白的表达,上调E-钙黏蛋白的表达。结论 miRNA-182可通过调节ZEB2、E-钙黏蛋白和波形蛋白的表达,进而抑制肺癌细胞的转移和侵袭。
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