抗鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及其鉴定北大核心CSCD |
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作者姓名: | 戴华陈俊华张海霞沈颖陈祥焦新安 |
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作者单位: | 1.扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室225001; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30972171,81472815) |
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摘 要: | 目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗ChIL-4 mAb细胞株;采用间接ELISA、间接免疫荧光法(IFA)以及Western blot法分析mAb的特异性。结果获得4株抗ChIL-4的mAb,分别命名为6A8、18F12、19F1、20G3,腹水mAb的ELISA效价为(1.6~6.4)×104;ELISA、IFA及Western blot结果显示该4株mAb均是特异针对重组ChIL-4的mAb,不具有识别重组牛IL-4、鸡γ干扰素(IFN-γ)等其他蛋白的能力。结论成功制备了抗ChIL-4的mAb。
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关 键 词: | 鸡白细胞介素4(ChIL-4) 单克隆抗体 |
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