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抗鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及其鉴定北大核心CSCD
引用本文:戴华陈俊华张海霞沈颖陈祥焦新安.抗鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及其鉴定北大核心CSCD[J].细胞与分子免疫学杂志,2017(7):986-990.
作者姓名:戴华陈俊华张海霞沈颖陈祥焦新安
作者单位:1.扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室225001;
基金项目:国家自然科学基金(30972171,81472815)
摘    要:目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗ChIL-4 mAb细胞株;采用间接ELISA、间接免疫荧光法(IFA)以及Western blot法分析mAb的特异性。结果获得4株抗ChIL-4的mAb,分别命名为6A8、18F12、19F1、20G3,腹水mAb的ELISA效价为(1.6~6.4)×104;ELISA、IFA及Western blot结果显示该4株mAb均是特异针对重组ChIL-4的mAb,不具有识别重组牛IL-4、鸡γ干扰素(IFN-γ)等其他蛋白的能力。结论成功制备了抗ChIL-4的mAb。

关 键 词:鸡白细胞介素4(ChIL-4)  单克隆抗体
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