| CRISPR/Cas9技术在HepG2基因组中进行定点基因突变的探索 |
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| 引用本文： | 肖利佳,龙寿斌,罗历,沈化清,郝建华. CRISPR/Cas9技术在HepG2基因组中进行定点基因突变的探索[J]. 海南医学, 2015, 0(1): 7-10 |
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| 作者姓名： | 肖利佳 龙寿斌 罗历 沈化清 郝建华 |
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| 作者单位： | 广东医学院附属南山医院检验科,广东 深圳,518052 |
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| 基金项目： | 深圳市卫生计生系统科研项目 |
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| 摘 要： | 目的探索利用CRISPR/Cas9技术在细胞株Hep G2基因组中进行定点突变。方法设计并构建靶向核受体LRH-1和ERRα基因组序列的g RNA质粒。将构建好的g RNA质粒和h Cas9质粒转染Hep G2细胞后,PCR扩增Hep G2基因组中LRH-1和ERRα基因的突变位点,并用SURVEYOR法检测突变情况。结果靶向核受体LRH-1和ERRα基因组序列的g RNA质粒构建成功。Hep G2细胞经g RNA-LRH-1/g RNA-ERRα和h Cas9转染后,针对LRH-1和ERRα的突变位点基因组序列的PCR产物经SURVEYOR法检测结果显示出现两条与预计大小相符的电泳条带。结论在Hep G2细胞中成功利用CRISPR/Cas9技术介导的基因组编辑对LRH-1和ERRα特定基因组序列产生突变,为构建其细胞株敲除模型奠定了基础。
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| 关 键 词： | CRISPR HepG2 基因组编辑 定点突变 |
Exploration of site-directed mutagenesis mediated by CRISPR/Cas9 system in HepG2 |
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| XIAO Li-jia,LONG Shou-bin,LUO Li,SHEN Hua-qing,HAO Jian-hua. Exploration of site-directed mutagenesis mediated by CRISPR/Cas9 system in HepG2[J]. Hainan Medical Journal, 2015, 0(1): 7-10 |
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| Authors: | XIAO Li-jia LONG Shou-bin LUO Li SHEN Hua-qing HAO Jian-hua |
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| Affiliation: | XIAO Li-jia;LONG Shou-bin;LUO Li;SHEN Hua-qing;HAO Jian-hua;Department of Clinical Laboratory, Nanshan Affiliated Hospital of Guangdong Medical College; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CRISPR HepG2 Genome editing Site-directed mutagenesis |
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