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表达载体的构建及对乳腺癌D2F2细胞小鼠移植瘤的治疗作用
引用本文:曹燕飞,吕娟,黄昊,寿成超.表达载体的构建及对乳腺癌D2F2细胞小鼠移植瘤的治疗作用[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2013,20(3):266-271.
作者姓名:曹燕飞  吕娟  黄昊  寿成超
作者单位:北京大学肿瘤医院 北京市肿瘤防治研究所 生物化学与分子生物学研究室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京 100142;长治医学院 生物化学教研室,山西 长治 046000;北京大学肿瘤医院 北京市肿瘤防治研究所 生物化学与分子生物学研究室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京 100142;首都医科大学 附属北京朝阳医院 检验科,北京 100020;北京大学肿瘤医院 北京市肿瘤防治研究所 生物化学与分子生物学研究室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京 100142;北京大学肿瘤医院 北京市肿瘤防治研究所 生物化学与分子生物学研究室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京 100142
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(No. 2009CB521805)
摘    要:目的:探讨靶向小鼠肝细胞再生磷酸酶-3(mouse phosphatase of regenerating liver-3, mPRL-3 )的DNA疫苗对小鼠乳腺癌D2F2细胞体内生长的抑制作用。 方法: 构建靶向 mPRL-3 的真核表达载体pVAX1-mPRL-3,并转染至鹌鹑肌成纤维细胞QM7内,Western blotting检测mPRL-3蛋白在QM7细胞中的表达;通过重组慢病毒Lv-mPRL-3或对照载体Lv-Ctrl感染小鼠乳癌D2F2细胞,分别建立高表达 mPRL-3 的mPRL-3-D2F2细胞或对照NC-D2F2细胞,Western blotting检测小鼠乳腺癌D2F2细胞中mPRL-3蛋白的表达。BALB/c小鼠左侧乳腺脂肪垫下分别接种mPRL-3-D2F2和 NC-D2F2细胞后,通过基因枪接种pVAX1-mPRL-3疫苗(mPRL-3-D2F2/pVAX1-mPRL-3),同时设立疫苗对照组(mPRL-3-D2F2/pVAX1-Ctrl)和细胞对照组(NC-D2F2/pVAX1-mPRL-3),检测小鼠的肿瘤体积及生存期。 结果: pVAX1-mPRL-3质粒经酶切鉴定及测序验证均正确,并能在QM7细胞中表达。Western blotting检测结果显示,慢病毒感染的mPRL-3-D2F2细胞中mPRL-3蛋白过表达,而NC-D2F2细胞中不表达mPRL-3蛋白。荷瘤小鼠经pVAX1-mPRL-3 DNA疫苗免疫,其肿瘤体积明显低于对照组\(835.3±509.8) vs (1 5430±578.4) mm3,P<0.01\],且pVAX1-mPRL-3疫苗能显著延长荷瘤小鼠的生存期(中位生存期55.5 vs 38 d,P<005)。 结论: 基因枪接种的靶向 mPRL-3 的DNA疫苗能抑制高表达mPRL-3的小鼠乳腺癌D2F2细胞移植瘤的生长,并延长荷瘤小鼠生存期,提示其对 mPRL-3 阳性肿瘤有潜在的治疗作用。

关 键 词:小鼠肝细胞再生磷酸酶-3  小鼠  乳腺癌  D2F2细胞  DNA疫苗  基因枪
收稿时间:2013/3/15 0:00:00
修稿时间:2013/4/20 0:00:00

expression vector and its therapeutic effects on breast cancer D2F2 cell xenografts in mice
Institution:Key Laboratory of Carcinogenesis and Translational Research of Ministry of Education, Institute of Tumor Prevention and Tratment of Beijing, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Cancer Hospital of Peking University, Beijing 100142, China; Department of Biochemistry, Changzhi Medical College, Changzhi 046000, Shanxi, China;Key Laboratory of Carcinogenesis and Translational Research of Ministry of Education, Institute of Tumor Prevention and Tratment of Beijing, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Cancer Hospital of Peking University, Beijing 100142, China; Department of Clinical Laboratory, Beijing Chaoyang Hospital Affiliated to Capital Medical University, Beijing 100020, China);Key Laboratory of Carcinogenesis and Translational Research of Ministry of Education, Institute of Tumor Prevention and Tratment of Beijing, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Cancer Hospital of Peking University, Beijing 100142, China;Key Laboratory of Carcinogenesis and Translational Research of Ministry of Education, Institute of Tumor Prevention and Tratment of Beijing, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Cancer Hospital of Peking University, Beijing 100142, China
Abstract:
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