荧光定量PCR检测GⅡ型扎幌样病毒方法的建立

[目的]建立贝类中GⅡ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法。[方法]通过用PEG6000对贝类中GⅡ型扎幌样病毒进行浓缩,用Trizol法提取病毒RNA,设计出针对GⅡ型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GⅡ型扎幌样病毒荧光定量PCR检测方法。[结果]此荧光定量PCR方法对贝类中GⅡ型扎幌样病毒检测呈现高度特异性,与诺瓦克样病毒、GⅠ型扎幌样病毒等无交叉反应,最低检出限可达102拷贝/μl,线性范围为102～106拷贝,标准曲线的相关系数为0.9993。[结论]本研究建立了贝类中GⅡ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法。