| 人骨保护素成熟肽表达载体的构建、表达及重组蛋白免疫学鉴定 |
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| 引用本文： | 王宝利,戴芳,郭刚,邱明才,张镜宇.人骨保护素成熟肽表达载体的构建、表达及重组蛋白免疫学鉴定[J].天津医药,2003,31(11):691-693,F002. |
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| 作者姓名： | 王宝利 戴芳 郭刚 邱明才 张镜宇 |
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| 作者单位： | 300052,天津医科大学总医院内分泌科、天津医科大学内分泌所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (项目编号 :30271154)，天津市自然科学基金资助项目 (项目编号 :023609711) |
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| 摘 要： | 目的：构建人骨保护素(OPG)成熟肽cDNA重组表达载体，实现其在毕赤酵母中的高效表达。方法：由人成骨细胞提取总RNA，经RT—PCR扩增得到人0PG成熟肽cDNA，克隆入分泌型表达载体pPIC9K，转化酵母细胞，G418筛选多拷贝整合的重组子进行甲醇诱导表达，产物行Western blottmg鉴定。结果：成功构建了人OPG成熟肽表达载体，该载体能在酵母细胞中获得分泌表达，诱导96h的表达量占上清总蛋白的30％。重组蛋白相对分子质量约55ku，可被0PG抗体识别。结论：重组人OPG成熟肽在酵母表达系统获得较高水平表达，为进一步研究开发基因工程药物准备了条件。
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| 关 键 词： | 人骨保护素 成熟肽 载体 重组蛋白 免疫学鉴定 基因表达 |
Construction and Expression of Recombinant Vector for Mature Peptide of Human Osteoprotegerin and Immunoassay of Its Recombinant Protein |
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| WANG Baoli,DAI Fang,GUO Gang,QIU Mingcai,ZHANG Jingyu.Construction and Expression of Recombinant Vector for Mature Peptide of Human Osteoprotegerin and Immunoassay of Its Recombinant Protein[J].Tianjin Medical Journal,2003,31(11):691-693,F002. |
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| Authors: | WANG Baoli DAI Fang GUO Gang QIU Mingcai ZHANG Jingyu |
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| Institution: | WANG Baoli,DAI Fang,GUO Gang,QIU Mingcai,ZHANG JingyuDepartment of Endocrinology,Tianjin Medical University Hospital,Tianjin 300052,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | osteoclasts suppressor factors immunologic pichia gene expression |
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