| 慢病毒载体介导CD1d和GFP融合基因转染PANC-1细胞的实验研究 |
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| 引用本文： | 刘为军,王昆华,师义,陈贤玉,郭世奎,徐玉.慢病毒载体介导CD1d和GFP融合基因转染PANC-1细胞的实验研究[J].昆明医学院学报,2013,34(3):31-34. |
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| 作者姓名： | 刘为军 王昆华 师义 陈贤玉 郭世奎 徐玉 |
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| 作者单位： | 云南省第一人民医院普外一科,云南省肠外肠内营养学研究中心,昆明理工大学附属昆华医院,云南昆明 650032 |
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| 基金项目： | 云南省科技厅应用基础研究联合专项基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建人免疫基因CD1d与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)融合基因慢病毒载体并转染人胰腺癌细胞(PANC-1).方法实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得CD1d的全外显子片段,使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿梭质粒转染293T细胞,包装成功后收集上清,浓缩,鉴定.通过慢病毒转染预实验确定MOI,进行人CD1d重组慢病毒载体转染胰腺癌PANC-1细胞株.结果电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的CD1d基因序列完全一致.重组慢病毒质粒可高效转染PANC-1细胞,荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光.结论成功构建了CD1d与GFP融合基因慢病毒表达载体并转染人胰腺癌细胞.
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| 关 键 词： | CD1d基因 GFP基因 慢病毒 转染 |
Experimental Research of CD1d and GFP Fusion Gene Transfects PANC-1 Cells Mediated by Lentiviral Vector |
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| LIU Wei-jun
,
WANG Kun-hua
,
SHI Yi
,
CHEN Xian-yu
,
GUO Shi-kui
,
XU Yu.Experimental Research of CD1d and GFP Fusion Gene Transfects PANC-1 Cells Mediated by Lentiviral Vector[J].Journal of Kunming Medical College,2013,34(3):31-34. |
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| Authors: | LIU Wei-jun WANG Kun-hua SHI Yi CHEN Xian-yu GUO Shi-kui XU Yu |
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| Institution: | (Dept.of General Surgery,The First People’s Hospital of Yunnan Province/Parenteral and Enteral Nutrition Research center of Yunnan Province,Kunming Medical University,Kunming Yunnan 650032,China) |
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| Keywords: | |
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