siRNA抑制K562细胞survivin基因的初步研究

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术,以survivin为靶基因,设计针对survivin的siRNA,通过Hiperfect介导转染K562细胞,研究survivin基因在白血病发生发展中的作用,为以survivin为靶点的白血病治疗奠定基础.方法 体外化学合成抑制survivin基因的siRNA片段,通过Hiperfect转染到K562细胞内,以无关siRNA、Hiperfect和未转染的细胞为对照,采用SYBR Green荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR方法检测siRNA的抑制效果,利用流式细胞仪Annexin Ⅴ-FITC/PI法检验细胞凋亡率,用四氮唑盐(MTT)法观察转染后48 h,72 h对细胞增生的影响.结果 siRNA转染K562细胞后,SYBR Green荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR结果显示survivin mRNA的表达量48 h、72 h分别比空白组下降了85.21%、94.35%,细胞生长受抑制,增殖能力减弱,其增殖抑制率于转染后48 h、72 h分别为45.02%和50.88%,细胞的凋亡率升高,分别为12.28%、21.55%.结论 靶向survivin的siRNA能特异性下调目的基因的表达、并能在体外抑制白血病细胞株的生长.survivin将成为白血病基因治疗的一个新靶点.

Suppression of survivin gene in leukemia cells by small interfering RNA