重组人TGF-β1在NIH/3T3细胞系中的表达及鉴定 |
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作者姓名: | 李勇 龙建银 韩本立 王会信 李昆 |
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作者单位: | 第三军医大学西南医院肝胆外科中心!重庆630038(李勇,韩本立,李昆),军事医学科学院基础医学研究所八室!北京(龙建银,王会信) |
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摘 要: | 选择腊质休法将人转化生长因子(TGF-β1)基因转移至NIH/3T3中,经G418(450ug/ml)筛选,随机挑选出13个表达克隆;其培养上清经体外斌活(加热或酸化)处理,用水貂肺上皮细胞株CCL-64生长抑制法测定TGF。用活性,证明绝大多数表达克隆的TCF-β1表达量均超过了100ng/ml.48h,最高克隆表达量为156ng/ml·48h。选择高表达克隆经Southernblot、Northernblot鉴定,证实外源人TGF-β1基因稳定重组人NIH/3T3细胞中,有mRNA表达。PC…
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