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类风湿关节炎患者血清免疫复合物的提纯及对人脐静脉内皮细胞增殖能力的影响
引用本文:张萍,徐敏,严孝岭,高德玉,高文博,虞伟,李晓军. 类风湿关节炎患者血清免疫复合物的提纯及对人脐静脉内皮细胞增殖能力的影响[J]. 临床检验杂志, 2014, 0(4): 287-290
作者姓名:张萍  徐敏  严孝岭  高德玉  高文博  虞伟  李晓军
作者单位:江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013/南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002
基金项目:国家自然科学基金项目(81071419);江苏省社会发展基金(BE2011786)。
摘    要:目的提纯并鉴定类风湿关节炎(RA)患者血清中免疫复合物(s-IC),并研究其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖功能的影响。方法用G蛋白亲和层析法分别从抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)阳性(ACPA+)RA患者、SLE患者及健康人对照血清中提取IC,用SDS-PAGE对提取的s-IC进行纯度鉴定,用化学发光免疫分析法测定s-IC中ACPA含量,用western blot法鉴定纯化IC中的瓜氨酸化蛋白质。体外培养HUVEC,分别用RA患者血清IC(RA-IC)、SLE患者血清IC(SLE-IC)、健康人血清IC(C-IC)刺激HUVEC,培养24 h后,用CCK-8细胞增殖法检测细胞的增殖水平。结果用G蛋白亲和层析法可自血清中提取出纯度较高的IC,ACPA+RA患者血清经G蛋白柱纯化后,IC中ACPA的回收率可达56.85%。western blot结果显示,RA患者s-IC中在相对分子质量(Mr)25 000~55 000间出现较多SLE-IC和C-IC中未有的条带。用s-IC刺激体外培养的HUVEC,当s-IC浓度为50μg/mL时,RA-IC与SLE-IC组HUVEC的增殖水平均显著高于C-IC组(P均0.01);当IC浓度为100μg/mL时,RA-IC组的HUVEC增殖水平显著高于SLE-IC与C-IC组(P均0.01)。结论成功提取ACPA+RA患者s-IC,RA-IC能显著促进HUVEC增殖。

关 键 词:类风湿关节炎;G蛋白亲和层析;瓜氨酸化蛋白;免疫复合物;人脐静脉内皮细胞
收稿时间:2014-02-10

Purification of serum immune complexes (ICs) from rheumatoid arthritis patients and effects of ICs on the proliferation of human umbilical vein endothelial cells
Abstract:
Keywords:rheumatoid arthritis   G-protein affinity chromatography   citrullinated protein   immune complex   human umbilical vein endothelial cell
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