HIV-1中国流行株假病毒的建立及其初步应用 |
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引用本文: | 孙伟,王蕊,史宣玲,傅阿丽,焦艳梅,吴昊. HIV-1中国流行株假病毒的建立及其初步应用[J]. 中国自然医学杂志, 2011, 0(4) |
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作者姓名: | 孙伟 王蕊 史宣玲 傅阿丽 焦艳梅 吴昊 |
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作者单位: | 首都医科大学附属北京佑安医院感染科;清华大学艾滋病综合研究中心; |
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基金项目: | 国家“十一五”艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(2008ZX10001-006) |
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摘 要: | 目的构建中国境内携带荧光素酶报告基因的B、B′C及AE亚型的HIV-1假病毒,研究该假病毒在检测病毒嗜性及中和抗体试验中的初步应用,为HIV-1的研究搭建一个方便、快捷且安全的平台。方法通过RT-PCR将3种亚型膜蛋白全长扩增,转化到表达质粒,构建膜蛋白质粒,与HIV骨架质粒共转染293T细胞,获得假病毒颗粒。假病毒感染GHOST细胞后,通过测定荧光值(RLU)来确定假病毒的感染效率、辅助受体使用情况及评价中和抗体作用。结果携带荧光素酶报告基因的HIV-1假病毒感染CD4+CCR5+CXCR4+GHOST细胞后,经检测被感染细胞的荧光值显著大于阴性对照组,证明假病毒能够在体外有效地感染GHOST细胞;利用辅助受体抑制剂方法确定了假病毒毒株的嗜性;假病毒感染GHOST细胞可被同亚型血清中和作用所抑制,抑制率随血清稀释度增加而减小。结论获得了携带荧光素酶报告基因的HIV-1假病毒,并初步证实了该假病毒可应用于病毒嗜性及中和抗体试验。
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关 键 词: | HIV-1 假病毒 细胞嗜性 中和抗体 |
Establishment of Chinese prevalent stains of HIV-1 pseudovirus and its preliminary application |
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Abstract: | |
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Keywords: | HIV-1 Pseudovirus Cell tropism Neutralizing antibodies |
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