摘 要: | 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种肝素结合的碱性多肽细胞生长因子,它首先由Gospodarowicz于1974年从牛垂体中提出,并发现bFGF能引起Balb/c 3T3成纤维细胞的增殖,并促进WI38二倍体成纤维细胞及来源于成年人根鞘和鼠胚皮肤的成纤维细胞的生长。我们利用基因重组技术,牛bFGF基因以Puc18作载体,在E.Coli JM103中表达成功,经纯化后得到分子量为20 000的牛bFGF。将这bFGF加入来源于鼠胚皮肤而处于休眠期的成纤维细胞,以~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入量为指标,观察到此bFGF有明显的促进成纤维细胞DNA合成的作用。 实验选用第三至第六代,取于昆明种小白鼠鼠胚皮肤的成纤维细胞。以5×10~4/ml的密度将其接种到96孔培养板上,8小时后换上含1%胎牛血清的DMEM,继续培养16~24小时,使细胞处于休眠期。然后加100ng/ml的bFGF,以此为O点,在每个设定的时间点前7小
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