| MAGE-1与结核杆菌HSP70融合基因的构建及原核表达 |
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| 引用本文： | 陈广生,隋延仿,叶菁,张秀敏,宋宏萍.MAGE-1与结核杆菌HSP70融合基因的构建及原核表达[J].免疫学杂志,2003,19(5):342-344. |
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| 作者姓名： | 陈广生 隋延仿 叶菁 张秀敏 宋宏萍 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30271464)，全军医药卫生科研基金(01Z084) |
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| 摘 要： | 目的 构建结核杆菌HSP70与肿瘤抗原MAGE-1的融合基因，在大肠杆菌中进行表达，并通过GST纯化系统进行分离纯化。方法 利用PCR方法扩增TBHSP70基因，经测序后连入原核表达载体pGEX-4T-1，再通过PCR方法扩增MAGE-1基因片段(289～927bp)，测序后插入TBHSP70基因的5’端，构建MAGE-1与TBHSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-MAGE-1-TBHSP70，含有该质粒的大肠杆菌DH5a进行诱导表达和分离纯化。结果 成功地扩增了TBHSP70基因与MAGE-1基因片段，测序结果表明与GenBank公布的序列一致；成功地构建了pGEX-MAGE-1-TBHSP70原核表达质粒，含有该质粒的大肠杆菌DH5α经IPTG诱导后表达一Mt约为125000的蛋白，经GST融合蛋白表达系统纯化，得到了MAGE-1与TBHSP70的融合蛋白。结论 成功地获得了MAGE-1与TBHSP70的融合蛋白，为研究MAGE-1-TBHSP70融合蛋白在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 结核杆菌 热休克蛋白70 黑色素相关抗原-1 融合基因 原核表达 |
| 文章编号： | 1000-8861(2003)05-0342-03 |
| 修稿时间： | 2002年12月3日 |
Construction and prokaryotic expression of the fusion gene of MAGE-1 and Mycobacterium tuberculosis HSP70 |
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| CHEN Guang-sheng,SUI Yan-fang,YE Jing,ZHANG Xiu-min,SONG Hong-ping.Construction and prokaryotic expression of the fusion gene of MAGE-1 and Mycobacterium tuberculosis HSP70[J].Immunological Journal,2003,19(5):342-344. |
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| Authors: | CHEN Guang-sheng SUI Yan-fang YE Jing ZHANG Xiu-min SONG Hong-ping |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis Heat shock protein 70 MAGE-1 Fusion gene Prokaryotic expression |
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